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土壤中细菌、真菌呼吸强度的测定
【来源/作者】周世红 【更新日期】2017-10-07

一、CO2容量测定法

1、方法原理

利用抗菌素作为选择抑制剂,利用其能专性抑制某些类群微生物的特点,来区分土壤中细菌和真菌的呼吸作用各自占总代谢的百分数。在测定土壤呼吸作用时,将链霉素(抑制细菌代谢)和放线菌酮(抑制真菌代谢)分别加入土壤中,然后比较加入和不加入抗菌素的土壤呼吸作用强度。

2、仪器与设备

广口瓶:500mL;酸滴定管,扭力天平;小块纱布;线绳。

3、试剂

(1)氢氧化钠溶液[c(NaOH=O0.mol·L-1〕;

(2)盐酸标准溶液[c(HCI)=0.1 mol·L-1]:吸取8.5mL浓盐酸(分析纯)溶于800mL蒸馏水中,定容至1000mL,用硼砂标定其浓度;

(3)酚酞乙醇溶液;

(4)链霉家硫酸盐;

(5)放线菌酮。

4、操作步骤

取500mL广口瓶4只,每瓶盛NaOH溶液(试剂1)20mL。称取20g新鲜土壤3份,其中1份加入链霉素硫酸盐(试剂4)2万单位;另一份加放线菌酮(试剂5)4万单位,分别混匀;第三份土壤不加任何抗菌素。每份土壤均用纱布包好,分别悬挂于广口瓶中或将土样置于瓶塞空隙处,并用妙布蒙住(图19-6),塞紧瓶塞,做好标记。不加土样的广口瓶作为对照。均置于280C恒温培养24h。小心取出广口瓶中土样后,于每瓶加数滴酚酞指示剂(试剂3),用盐酸标准溶液(试剂2)滴定NaOH溶液至红色消失,记录所用HCl的数量。

5、结果计算

由于各处理中有等量的NaOH用于吸收土壤呼吸时所释放的CO2,可求出滴定对照与各处理所消耗的HCI数最之差。按每消1mlL耗氢氧化钠[[c(NaOH)=0.1 mol·L-1〕相当于2.2 mg CO2,分别计算出土壤的总呼吸作,以及土壤真菌和土壤细菌呼吸作用的CO2释放量,并计算出各部份占总呼吸作用的百分数。

二、华勃测压法

1、试剂

(1) KOH溶液;[p(KOH)=100g·L-1]:称取KOH 100g溶于蒸馏水中。稀释至1L。

(2)葡萄糖溶液[c(C6H12O6)=0.1 mol·L-1〕:称取18g葡萄糖(C6H12O6)溶于水,稀释至1L;

(3)链霉素硫酸盐:2000单位,

(4)放线菌酮:4000单位.

2、操作步骤

按华勃测压法的测定操作(进行。所不同的是,按表19.4所规定的量向反应瓶添加样品。

3、结果计算

细菌呼吸作用占土壤总呼吸作用=[ (A-B)/(A-D)] ×100

真菌呼吸作用占土壤总呼吸作用=[(A-C)/(A-D)] ×100

式中:A——土壤十基质;

B——土壤+基质+链霉素;

C——土壤+基质十放线菌酮;

D——土壤+基质+链霉素+放线菌酮。

参考资料:土壤农业化学分析方法


【关键词】细菌,真菌,土壤,强度,测定,国家标准物质网 

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